日本细胞免疫疗法_精品毛片免费观看_肿瘤免疫治疗_精品毛片_NK细胞疗法 -精品裸体舞一区二区三区- 免疫密码

電話號碼
免疫治療課堂

人源抗體庫篩選

時間: 2024-10-17 15:47 來源: 免疫密碼

前述的抗體改造技術、分子展示技術構建出的人源化單克隆抗體要經過篩選才能大量獲得。良好的篩選方法對于最大程度地富集到特異性好、親和力高的新抗體有重要的意義。目前認為可通過構建大容量抗體庫、嚴格篩選條件、優化篩選策略等方法來從抗體庫中獲得高親和力抗體。以下以噬菌體抗體庫的篩選為例進行說明,其篩選主要包括淘篩和鑒定兩個步驟。淘篩是指將噬菌體抗體庫與特定的抗原共同孵育,經過數論的洗脫后收集結合的噬菌體,將其用來感染細菌并擴增,之后再經過3~輪的吸附-洗脫-擴增循環,富集到于抗原特異性結合的噬菌體感染的多克隆菌株;鑒定是指將淘篩出的噬菌體感染細菌鋪板后,從多克隆菌株中挑選出高特異性的單克隆菌株。篩選方法主要有固相或液相純化抗原篩選法、全細胞篩選法、組織切片篩選法、體內篩選法,分別詳述如下。

(1)固相或液相純化抗原篩選法:是經典的、傳統的純化方法。固相篩選是指將抗原包被再固相介質上,如酶標板、試管、親和層析柱等,然后加入待篩的抗體庫,一段時間洗脫掉非親和性的抗體,收集高親和力的抗體,這種方法操作簡單,但需要大量的純化或重組抗原。液相篩選是指借助生物素、親和素,在液相反應體系中提純抗體,可以通過將抗原與生物素相連后固定在包被有鏈親和素的順磁珠上對噬菌體抗體庫進行篩選,或者將生物素化的抗原先與噬菌體庫相互作用,然后加入偶聯有鏈親和素的磁珠,富集能與抗原結合的噬菌體抗體。經典篩選技術的前提條件是目標抗體所靶向的抗原明確且能得到純化品,對于抗原無法提純、抗原性質不確定或經傳統篩選會發生抗原失活者不適用。

(2)全細胞篩選法:指用完整的全細胞系來提純抗體庫,適合于抗原不能提純、性質不明確(如腫瘤抗原)者,全細胞篩選要求目標抗原要有較高的表達水平,可以在篩選前先用不表達目標抗原的細胞進行孵育來初步提純,細胞篩選受到非特異性大、背景值髙、洗滌過程中特異性配體損失等方面的影響,抗體的富集較慢,且多次篩選會很容易丟失稀有的特異性噬菌體抗體。目前,全細胞篩選主要的方法有:扣除篩選、炎光細胞分選法、磁性細胞分選法、內化篩選等。

(3)組織切片篩選法:Tordsson等使用轉移性黑色素瘤的冰凍組織切片經固定、封閉后與噬菌體抗體庫作用,經幾輪吸附-洗脫-擴增循環后使特異的噬菌體抗體富集在切片上,此種方法可以原位結合到組織切片上,更適用于臨床,但因為抗原量有限,富集的抗體量也較少。

(4)體內篩選法:由于有些活體細胞外培養難以存活或會發生膜變性,體外可以觀察到的噬菌體抗體的特異性在體內可能不明顯或者不存在,故體內篩選具有特殊的意義。有實驗證明,這種篩選方法更適合于針對腫瘤血管內皮細胞上特異性標志物的抗體的分離篩選。

  1. 最新內容

免疫密碼
主站蜘蛛池模板: 切铝机-数控切割机-型材切割机-铝型材切割机-【昆山邓氏精密机械有限公司】 | 3A别墅漆/3A环保漆_广东美涂士建材股份有限公司【官网】 | 合肥网带炉_安徽箱式炉_钟罩炉-合肥品炙装备科技有限公司 | 艾默生变频器,艾默生ct,变频器,ct驱动器,广州艾默生变频器,供水专用变频器,风机变频器,电梯变频器,艾默生变频器代理-广州市盟雄贸易有限公司官方网站-艾默生变频器应用解决方案服务商 | 特种电缆厂家-硅橡胶耐高温电缆-耐低温补偿导线-安徽万邦特种电缆有限公司 | 北京中创汇安科贸有限公司| 广州印刷厂_广州彩印厂-广州艺彩印务有限公司 | 除尘器布袋骨架,除尘器滤袋,除尘器骨架,电磁脉冲阀膜片,卸灰阀,螺旋输送机-泊头市天润环保机械设备有限公司 | LED显示屏_LED屏方案设计精准报价专业安装丨四川诺显科技 | 冲锋衣滑雪服厂家-冲锋衣定制工厂-滑雪服加工厂-广东睿牛户外(S-GERT) | 合肥宠物店装修_合肥宠物美容院装修_合肥宠物医院设计装修公司-安徽盛世和居装饰 | 礼堂椅厂家|佛山市艺典家具有限公司 | 酒糟烘干机-豆渣烘干机-薯渣烘干机-糟渣烘干设备厂家-焦作市真节能环保设备科技有限公司 | 耐火砖厂家,异形耐火砖-山东瑞耐耐火材料厂 | 捷码低代码平台 - 3D数字孪生_大数据可视化开发平台「免费体验」 | LCD3D打印机|教育|桌面|光固化|FDM3D打印机|3D打印设备-广州造维科技有限公司 | Copeland/谷轮压缩机,谷轮半封闭压缩机,谷轮涡旋压缩机,型号规格,技术参数,尺寸图片,价格经销商 CTP磁天平|小电容测量仪|阴阳极极化_双液系沸点测定仪|dsj电渗实验装置-南京桑力电子设备厂 | 泰来华顿液氮罐,美国MVE液氮罐,自增压液氮罐,定制液氮生物容器,进口杜瓦瓶-上海京灿精密机械有限公司 | 注塑模具_塑料模具_塑胶模具_范仕达【官网】_东莞模具设计与制造加工厂家 | 炒货机-炒菜机-炒酱机-炒米机@霍氏机械 | 悬浮拼装地板_篮球场木地板翻新_运动木地板价格-上海越禾运动地板厂家 | 步进_伺服_行星减速机,微型直流电机,大功率直流电机-淄博冠意传动机械 | 济南铝方通-济南铝方通价格-济南方通厂家-山东鲁方通建材有限公司 | 一体化污水处理设备-一体化净水设备-「山东梦之洁水处理」 | 脉冲除尘器,除尘器厂家-淄博机械 | 郑州水质检测中心_井水检测_河南废气检测_河南中环嘉创检测 | SDG吸附剂,SDG酸气吸附剂,干式酸性气体吸收剂生产厂家,超过20年生产使用经验。 - 富莱尔环保设备公司(原名天津市武清县环保设备厂) | 锂电池砂磨机|石墨烯砂磨机|碳纳米管砂磨机-常州市奥能达机械设备有限公司 | 济南玻璃安装_济南玻璃门_济南感应门_济南玻璃隔断_济南玻璃门维修_济南镜片安装_济南肯德基门_济南高隔间-济南凯轩鹏宇玻璃有限公司 | 楼承板设备-楼承板成型机-免浇筑楼承板机器厂家-捡来 | 潍坊青州古城旅游景点攻略_青州酒店美食推荐-青州旅游网 | 防爆型气象站_农业气象站_校园气象站_农业四情监测系统「山东万象环境科技有限公司」 | 葡萄酒灌装机-食用油灌装机-液体肥灌装设备厂家_青州惠联灌装机械 | 华溶溶出仪-Memmert稳定箱-上海协烁仪器科技有限公司 | 附着力促进剂-尼龙处理剂-PP处理剂-金属附着力处理剂-东莞市炅盛塑胶科技有限公司 | 寮步纸箱厂_东莞纸箱厂 _东莞纸箱加工厂-东莞市寮步恒辉纸制品厂 | 连续密炼机_双转子连续密炼机_连续式密炼机-南京永睿机械制造有限公司 | 海鲜池-专注海鲜鱼缸、移动海鲜缸、饭店鱼缸设计定做-日晟水族厂家 | 同学聚会纪念册制作_毕业相册制作-成都顺时针宣传画册设计公司 | 巨野电机维修-水泵维修-巨野县飞宇机电维修有限公司 | 河南膏药贴牌-膏药代加工-膏药oem厂家-洛阳今世康医药科技有限公司 |